無(wú)菌室的設置
無(wú)菌室應根據既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來(lái)設置。其基本要求有以下幾點(diǎn)：
1.無(wú)菌室應有內、外兩間，內間是無(wú)菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大，以便于空氣滅菌。內間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應有天花板。
2.內間應當設拉門(mén)，以減少空氣的波動(dòng)，門(mén)應設在離工作臺最遠的位置上；外間的門(mén)最好也用拉門(mén)，要設在距內間最遠的位置上。
3.在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上，應開(kāi)一個(gè)小窗，作接種過(guò)程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內間的次數，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都掛對拉的窗扇。
4.無(wú)菌室容積小而嚴密，使用一段時(shí)間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進(jìn)門(mén)處的頂棚上（即離工作臺最遠的位置），最好為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開(kāi)啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
無(wú)菌室內設備和用具
1.無(wú)菌室內的工作臺，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺面水平。
2.在內室和外室各安裝一個(gè)紫外燈（多為30W）。內室的紫外線(xiàn)燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線(xiàn)燈可安裝在外室中央。
3.外室應有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
4.內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。
無(wú)菌室的滅菌消毒
1.薰蒸：這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(cháng)時(shí)間，污染比較嚴重時(shí)，應進(jìn)行薰蒸滅菌?？捎眉兹?、乳酸或硫磺薰蒸。
2.噴霧：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng)，并有殺菌作用?？捎?%石炭酸噴霧。
3.紫外線(xiàn)照射：在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線(xiàn)有較好的殺菌效果。通常應開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30～60min。
無(wú)菌室工作規程
1.無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30min以上，或在使用前30min，對內外室用5%石炭酸噴霧。
2.用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
3.將各種需用物品搬進(jìn)內室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進(jìn)內室工作。
4.接種操作前實(shí)驗室裝修，用70%酒精棉球擦手；進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚塵。
5.工作中應注意安全。如遇棉塞著(zhù)火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒；如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續操作。
6.工作結束實(shí)驗室裝修，立即將臺面收拾干凈，將不應在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開(kāi)紫外線(xiàn)燈照射30min。
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